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摘要
目的 探究β-链蛋白(β-catenin)基因沉默对糖尿病血管钙化的抑制作用。方法 体外培养大鼠下肢股动脉内皮细胞。调整稳转细胞状态，分为空白组、阴性对照组、实验组和模型组。空白组给予常规培养；实验组用β-catenin慢病毒转染48 h后，给予钙化培养基培养12 d;阴性对照组用空载慢病毒细胞转染48 h后，给予钙化培养基培养12 d;模型组细胞在钙化培养基培养12 d,诱导细胞钙化。用实时荧光定量聚合酶链反应检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、β-catenin、碱性磷酸酶(ALP)和骨桥蛋白(OPN)mRNA的表达水平，用激光共聚焦检测细胞β-catenin蛋白定位。结果 病毒感染48 h后，空白组、阴性对照组和实验组的β-catenin mRNA分别为1.00±0.08,1.03±0.07和0.22±0.01。培养12 d后，空白组、模型组和实验组的α-SMA mRNA分别为1.00±0.03,3.68±0.23和1.99±0.10,β-catenin mRNA分别为1.00±0.07,4.51±0.16和2.15±0.15,ALP mRNA分别为1.00±0.09,4.02±0.13和2.30±0.12,OPN mRNA分别为1.00±0.08,5.32±0.50,3.12±0.27。实验组的上述指标与模型组比较，差异均有统计学意义(均P<0.01)。实验组核内β-catenin表达明显减少。结论 糖尿病大鼠下肢内皮细胞钙化发生机制是通过高糖诱导β-catenin mRNA翻译β-catenin蛋白在细胞核中的表达，从而激活下游基因的转录，沉默β-catenin基因可抑制钙化进程。
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