科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的：利用多色量子点（QDs）对细胞角蛋白（CK）、雌激素受体（ER）和人类表皮生长因子受体2(HER-2)进行间接法荧光染色，探讨同种属来源一抗多标记QDs染色的可行性和应用效果。方法：利用EliVision二步法对28例浸润性乳腺癌组织中CK、HER-2和ER进行免疫组化染色，利用QDs-565、QDs-655和QDs-605对28例浸润性乳腺癌组织中CK、HER-2和ER进行间接法单标记荧光染色和三标记荧光染色，使用装备有CRi Nuance多光谱成像系统的Olympus BX51荧光显微镜采集荧光光谱信息，并从采集的荧光图像中选取单个乳腺癌细胞进行亚细胞定位分析。结果：对于单个靶标而言，免疫组化染色和QDs荧光染色都能较清楚地显示靶标的亚细胞定位和表达情况。三标记荧光染色结果显示，绿色QDs-565标记了主要表达于肿瘤细胞质的CK，呈现出癌巢的轮廓，红色QDs-655和品红色QDs-605分别标记了表达于肿瘤细胞膜的HER-2和细胞核的ER，两种同种属来源的一抗HER-2和ER未发生明显的交叉反应。对三种靶标的亚细胞定位分析显示，胞核中ER的品红色荧光信号与胞膜上HER-2的红色荧光信号和胞质中CK的绿色荧光信号在空间上分离清楚，未发生明显光谱重叠现象。结论：基于多色QDs的间接法多标记荧光染色，通过调整抗体浓度、优化孵育时间、彻底清洗等手段，可较好地避免一抗种属来源相同时的交叉反应，与CRi Nuance多光谱成像系统进行结合，有利于对各个靶标分子进行分离和亚细胞定位，实现更准确的光谱定量分析。
-
单位武汉大学中南医院
