肺炎球菌多糖衍生物中1,4-丁二胺残留量核磁共振检测方法的建立及验证

作者：杜娇; 周海飞; 李献林; 马凯凯; 张钰奇; 马钰; 杨英英; 杨田瑶; 李阿妮^*; 罗树权

来源：微生物学免疫学进展, 2022, 50(05): 21-27.

DOI：10.13309/j.cnki.pmi.2022.05.005

• 肺炎球菌
• 多糖衍生物
• 1,4-丁二胺
• 核磁共振
• 残留量
• 验证

目的 建立核磁共振(nuclear magnetic resonance, NMR)法检测肺炎球菌多糖衍生物中1,4-丁二胺残留量的方法，并对方法进行验证。方法 建立氢谱(1H-NMR)检测方法：脉冲程序为zg30,温度为298 K(24.85℃),图谱宽度为7 211 Hz,扫描次数为512次，中心频率为4.70 ppm,弛豫延迟时间为9 s;对该方法进行线性、专属性、准确度、精密度、耐用性验证，并确定该方法的定量限。结果 以1,4-丁二胺中H-1和H-4位质子峰为特征峰，该方法检测1,4-丁二胺专属性较好。在0.05～5.00 mg/mL范围内，1,4-丁二胺质量浓度与其对应的峰面积呈良好的线性关系，相关系数R2=0.999。1,4-丁二胺添加实验回收率在92.73%～99.51%之间；建立的方法重复性及中间精密度均良好，不同质量浓度1,4-丁二胺测定值RSD均小于5%;该方法的定量限为0.01 mg/mL;改变温度和扫描次数后1,4-丁二胺的检测结果差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 建立的1H-NMR检测方法简便、快速、准确，经验证各项指标均符合质控要求，可用于肺炎球菌多糖衍生物中1,4-丁二胺残留量的测定。

• 单位
  兰州生物制品研究所有限责任公司