全反式维A酸对恶性黑素瘤A375细胞上皮-间质转化相关分子表达的影响

作者：向桂琼; 樊卓; 党云; 郭坤^*; 耿松梅^*

来源：中华皮肤科杂志, 2021, 54(01).

• 黑色素瘤
• 上皮-间质转化
• 钙黏着糖蛋白类
• 波形蛋白
• β连环素
• 全反式维A酸

目的研究全反式维A酸(ATRA)对人恶性黑素瘤A375细胞中上皮-间质转化(EMT)相关分子表达的影响。方法用含10 μmol/L ATRA的DMEM培养基和DMEM培养基分别处理A375细胞24和48 h作为ATRA-1组和ATRA-2组、对照1组和对照2组, 采用实时定量PCR法检测EMT相关基因上皮钙黏着蛋白、神经钙黏着蛋白、波形蛋白、β联蛋白mRNA的表达。Western印迹法检测ATRA-1组、ATRA-2组、对照1组中上述蛋白的相对表达量, 直接免疫荧光法检测上皮钙黏着蛋白和波形蛋白的荧光强度。统计分析采用两因素方差分析、单因素方差分析及LSD-t检验。结果 ATRA-1组和ATRA-2组分别与对照1组和对照2组相比, 上皮钙黏着蛋白mRNA的表达均显著增加(F = 13.148、31.529, P < 0.05), 而神经钙黏着蛋白、波形蛋白、β联蛋白mRNA的表达均显著降低(均P < 0.05);ATRA-2组上皮钙黏着蛋白mRNA的表达显著高于ATRA-1组(F = 13.148, P < 0.05), 而其他3种蛋白mRNA的表达显著低于ATRA-1组(均P < 0.05);对照1组与对照2组上述蛋白的mRNA表达差异无统计学意义(均P > 0.05)。Western印迹法显示, 与对照1组相比, ATRA-1组和ATRA-2组上皮钙黏着蛋白表达上调, 而神经钙黏着蛋白、波形蛋白、β联蛋白表达均下调(均P < 0.05);与ATRA-1组相比, ATRA-2组上皮钙黏着蛋白表达上调(P < 0.05), 神经钙黏着蛋白、波形蛋白、β联蛋白表达下调(均P < 0.05)。直接免疫荧光显示, ATRA-1组、ATRA-2组上皮钙黏着蛋白的荧光强度(6.23 ± 0.08、10.37 ± 0.13)显著高于对照1组(2.37 ± 0.14, 均P < 0.05), 而波形蛋白的荧光强度(15.17 ± 0.18、10.29 ± 0.03)显著低于对照1组(50.16 ± 0.26, 均P < 0.05), 抑制上皮向间质转化。结论 ATRA可上调A375细胞中上皮钙黏着蛋白的表达, 降低神经钙黏着蛋白、波形蛋白、β联蛋白的表达, 可能抑制A375细胞发生EMT现象。

• 单位
  西安医学院第一附属医院