马尾松胚性细胞团诱导体系优化

作者：王杰; 杨模华^*; 郑力尉; 李朋乐; 陈国敏; 王舒祺; 单易婷

来源：中南林业科技大学学报, 2020, 40(11): 73-84.

DOI：10.14067/j.cnki.1673-923x.2020.11.010

• 马尾松
• 胚性细胞团
• 基因型
• 碳源
• 氮源
• 氨硝比

【目的】马尾松胚性细胞团诱导率低一直限制着马尾松体细胞胚胎发生体系的实践应用,探讨了影响马尾松胚性细胞团诱导的几个关键因子及其效应,以期提高胚性细胞团诱导率,优化胚性细胞团诱导发生体系。【方法】以包含未成熟胚的雌配子体为外植体,LP培养基为基本培养基,探讨家系基因型、激素组合、培养基碳源及氮源等因子对马尾松胚性细胞团诱导的影响。【结果】家系基因型对马尾松胚性细胞团诱导有显著性影响,家系平均诱导率最高达17.5%,最低为0;3组激素组合的诱导率无显著差异,其中1.5 mg/L 2.4-D+1.0 mg/L 6-BA处理获得较高诱导率(14.85%);不同碳源类型及水平处理下(麦芽糖、蔗糖、葡萄糖),各家系的最佳诱导反应呈现家系与碳源类型及水平的交互效应,其中k1家系在30 g/L蔗糖处理中可获得最高诱导率(40%),而k3家系则在30 g/L葡萄糖处理中获得最高诱导率(22%),综合4个家系在不同碳源水平处理下的综合诱导效应,在30 g/L蔗糖处理中获得的平均诱导率最高(18.51%);调整培养基中的氨硝比(NH4+/NO3-)有助于胚性细胞团诱导,其氨硝比(NH4+/NO3-)的合适比例范围为0.2～0.4,平均诱导率可达14.23%,而单一性降低NH4+浓度至1/2LP浓度水平或增加培养基中NO3-浓度至3/2 LP浓度水平,诱导率分别可提高到17.86%和15.48%。【结论】马尾松胚性细胞团诱导有显著的家系效应,需选择诱导敏感型家系为实验材料来源;调整诱导培养基中碳源类型与浓度水平,同时考虑培养基中的氨硝比,对优化胚性细胞团诱导有积极作用,推荐30 g/L蔗糖为碳源,并调整培养基中的氨硝比(NH4+/NO3-)范围0.2～0.4,可提高胚性细胞团诱导率。研究结果可为提升胚性细胞团诱导率建立稳定的马尾松胚性细胞团诱导体系提供研究参考和技术支撑。

• 单位
  中南林业科技大学