摘要
目的探讨血管生成素1(ANGPT1)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其对肺癌细胞生物学行为的影响。方法收集40例NSCLC患者肿瘤组织及癌旁组织、NSCLC细胞系(A549、HCC827、H460和H1299)和人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)行研究检测。转染ANGPT1真核表达质粒至A549细胞(pc-ANGPT1组), 设定空载表达质粒转染空载组(pcDNA组)和空白对照组(Control组)。反转录实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测ANGPT1基因信使核糖核酸(mRNA)和蛋白表达。细胞计数(CCK-8)检测细胞吸光度, 流式细胞仪检测细胞凋亡, Transwell检测细胞迁移及侵袭。两组间比较行t检验, 多组间比较采用单因素方差分析(组间比较采用SNK检验)。结果 NSCLC患者肿瘤组织ANGPT1基因mRNA和蛋白表达显著低于癌旁组织(mRNA表达为0.17±0.04比1.03±0.05, 蛋白表达为0.27±0.06比0.83±0.07), 差异有统计学意义(t=24.145、19.381, P<0.05)。A549、HCC827、H460和H1299细胞ANGPT1基因mRNA和蛋白表达显著低于BEAS-2B细胞(mRNA表达为0.11±0.03、0.32±0.06、0.28±0.03、0.37±0.06比1.05±0.08, 蛋白表达为0.23±0.02、0.29±0.05、0.27±0.04、0.35±0.05比0.79±0.06), 差异有统计学意义(F=15.447、13.516, P<0.05)。pc-ANGPT1组A549细胞ANGPT1基因mRNA和蛋白表达、细胞凋亡率显著高于pcDNA和Control组[ANGPT1基因mRNA为4.24±0.13比1.01±0.05、1.02±0.04, ANGPT1基因蛋白为1.14±0.08比0.25±0.04、0.24±0.04, 细胞凋亡率为(19.27±3.65)%比(3.89±0.78)%、(3.82±0.81)%], 48、72、96 h细胞吸光度、细胞迁移数及侵袭数显著低于pcDNA和Control组[48 h吸光度值为0.36±0.05比0.49±0.07、0.52±0.06, 72 h吸光度值为0.47±0.07比0.73±0.08、0.79±0.07, 96 h吸光度值为0.61±0.08比0.97±0.11、1.03±0.09, 细胞迁移数为(60.34±9.42)个比(122.73±12.59)、(121.25±14.16)个, 细胞侵袭数为(29.84±5.37)个比(75.31±8.65)、(78.29±8.90)个], 差异有统计学意义(F=34.166、21.542、29.942、8.929、11.375、13.983、31.135、24.567, P<0.05)。结论 ANGPT1基因在NSCLC中呈低表达, 可促进NSCLC细胞凋亡并抑制增殖、迁移及侵袭。
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单位山东大学齐鲁医院; 山东第一医科大学