RNA干扰抑制多形性胶质母细胞瘤核因子-κB的表达作用及其机制

作者：戴缤; 朱广通; 肖智勇; 黄辉; 关峰; 毛贝贝; 苏海洋; 林镇阳; 彭伟澄; 胡志强

来源：中华实验外科杂志, 2018, 35(09): 1694-1696.

• RNA干扰
• 核因子-κB
• 多形性胶质母细胞瘤
• 炎性因子
• p65蛋白

目的探讨RNA干扰(RNAi)抑制多形性胶质母细胞瘤核因子-κB(NF-κB)的表达作用及其机制。方法构建慢病毒p65特异性靶序列及其表达载体, 并将其包装至293T细胞, 之后转染A172细胞, 小鼠随机分为空白组、模型组、低和高RNAi组及阴性对照组。在小鼠皮下造模14 d后低和高RNAi组小鼠经尾静脉分别注射RNAi慢病毒载体颗粒50、100 μl(1×105 TU/μl)、阴性对照组注射空白载体病毒颗粒100 μl(1×105 TU/μl)。结果慢病毒转染A172细胞后可以显著抑制其增殖(P=0.000), 与对照组比较, 高剂量组存活率为60%。NF-κB p65特异性靶序列定向干扰A172细胞, 3个RNAi组中p65蛋白的表达水平显著下降(P=0.000)。动物实验结果显示, 除空白组外, 其余所有组小鼠体重自植瘤9 d后体重开始出现下降, 高低剂量慢病毒干扰组小鼠体重在第18天体重出现回升, 其中体重回升高剂量干扰效果略优于低剂量干扰组。模型组小鼠肿瘤体积显著高于两个RNAi组(P=0.000), 阴性慢病毒对照组小鼠肿瘤体积无显著缩小。模型组和阴性对照组肿瘤组织中p65处于高表达水平, RNA高低剂量干扰组p65表达水平显著下降(P=0.000)。炎性因子白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在模型组中处于高表达水平, 使用p65干扰RNA后能够有效抑制IL-1β和TNF-α的表达(P=0.000)。结论特异性干扰NF-κB p65蛋白表达后能够有效改善小鼠皮下种植胶质瘤A172带来的荷瘤压力和降低小鼠机体炎性反应。

• 单位
  首都医科大学附属北京世纪坛医院