摘要
目的制备金(gold,Au)纳米颗粒HBV DNA基因探针,通过透射电镜直接检测乙肝患者血清中的HBV DNA,实现不经过PCR扩增检测DNA。方法制备Au纳米颗粒和Au纳米颗粒HBV DNA基因探针,用荧光标记法检测纳米颗粒探针表面寡核苷酸的覆盖数和杂交效率。在检测体系中加入乙肝患者血清中提取的HBV DNA,透射电镜下观察。结果制备的Au纳米颗粒粒径为(10±5)nm,水相分散良好,在520nm有Au特征性的最大吸收峰,经寡核苷酸修饰后,其最大吸收峰改变为524nm。Au纳米颗粒基因探针表面寡核苷酸的最大覆盖数目为(132±10)条,最大杂交效率为(22±3)%。在液相中与HBV DNA反应后,透射电镜下可观察到Au纳米颗粒凝聚成大的聚集体。结论成功制备了Au纳米颗粒HBV DNA基因探针,可直接用于HBV DNA的检测。
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