摘要
目的合成沉默P38基因的特异小分子干扰RNA(siRNA),通过模拟的肺移植模型,探讨p38 siRNA对大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)缺氧复氧损伤的影响。方法将p38 siRNA或非靶向siRNA转染至大鼠PMVEC并暴露于模拟的肺移植型。再灌注2 h和4 h,检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、丙二醛水平、超氧化物歧化酶(SOD)含量和细胞凋亡;检测细胞培养上清液白细胞介素(IL)-1、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;检测细胞核转录因子-κB(NF-κB)和激活蛋白1(AP-1)的表达。结果与非靶向siRNA比较,p38 siRNA在再灌注2 h和4 h降低LDH漏出率(22.3±5.7与45.1±6.2,46.3±7.3与75.6±12.4),减少丙二醛水平(4.1±2.2与7.1±2.1,3.9±0.5与6.1±1.2),增加SOD含量(12.8±3.2与9.4±1.1,10.8±1.2与7.0±1.1),降低IL-1(288±89与592±95,380±94与775±175)和IL-6(38±5与70±12,80±20与118±17)水平,抑制细胞凋亡(2.8±0.6与4.1±1.4,3.1±1.1与5.8±1.3)。p38 siRNA对TNF-α的表达无影响。p38 siRNA在再灌注2 h和4 h减少NF-κB p65磷酸化和NF-κB抑制剂激酶β磷酸化,增加NF-κB抑制剂α表达,但不影响AP-1的磷酸化表达。结论通过抑制NF-κB激活经典通路,p38 siRNA减轻大鼠PMVEC氧化应激、炎症和细胞凋亡,保护细胞完整性,减轻缺氧及复氧损伤。
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