运用表位嵌合型3型腺病毒载体制备肠道病毒71型单克隆抗体

作者：樊晔; 田新贵; 薛春燕; 刘铭龙; 周志超; 李潇; 李晨阳; 周荣

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2016, 32(08): 1115-1119.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.007830

• 肠道病毒71型
• 人3型腺病毒载体
• 单克隆抗体
• 中和表位

目的制备针对肠道病毒71型(EV71)的单克隆抗体(m Ab)。方法将六邻体中同时嵌入EV71 SP55与SP70两个中和表位的重组人3型腺病毒作为免疫原免疫小鼠,利用杂交瘤技术制备m Ab。用病毒微量中和实验、间接ELISA、Western blot法和直接免疫荧光染色法进行鉴定。结果获得了4株分泌EV71特异性m Ab的杂交瘤细胞,D2C9、2C4、I2G2、I12C3,其中D2C9株腹水间接ELISA实验效价为1∶8 000 000,其余3株为1∶500 000;Western blot法和ELISA结果表明4株m Ab均识别EV71病毒VP1蛋白。D2C9针对SP70表位,2C4、I12C3、I2G2针对SP55表位;直接免疫荧光实验结果显示4株m Ab均能与EV71特异性结合,而与柯萨奇病毒16型(Cox A16)不结合。结论获得了对EV71亲和力高、特异性好并且与Cox A16无交叉反应的m Ab。

• 单位
  广州医科大学; 广州锐达生物科技有限公司; 呼吸疾病国家重点实验室; 广州呼吸疾病研究所