定量检测重组抗白介素6受体人源化单克隆抗体HS628的ELISA方法的建立及确证

作者：张代超; 魏峰; 毛素梅; 刘运龙; 任欣怡; 李金龙; 陈知航; 程远国

来源：生物技术通讯, 2015, 26(05): 672-677.

• 重组抗白介素6受体人源化单克隆抗体
• 间接ELISA法
• 生物素-亲和素ELISA法
• 药代动力学

目的:建立一种灵敏、特异、快速、经济的ELISA方法,用于检测食蟹猴血清中重组抗白介素6受体人源化单克隆抗体HS628的含量。方法:对ELISA与生物素-亲和素ELISA(BA-ELISA)方法进行比较,最终采用BA-ELISA法对HS628进行定量。包被抗体为羊抗人Ig G单抗,以生物素标记的重组白介素6受体作为检测抗原,以HRP标记的链霉亲和素作为放大剂,最终用单组分显色液(TMB)显色。结果:建立了特异性检测HS628的ELISA方法并完成方法学确证,该方法的线性范围为1.64400 ng/m L,灵敏度为1.64 ng/m L,精密度、准确度、回收率及稳定性符合要求,与对照品校正标准曲线吻合。结论:用建立的ELISA方法测定猴血清中HS628的含量能满足新生物制药临床前药代动力学研究指导原则要求,可用于HS628的检测。

• 单位
  吉林农业大学; 军事医学科学院; 广西桂东灵长类开发实验有限公司; 生命科学学院