miR-150-5p在甲状腺癌中的表达及其生物学功能研究

作者：吴彬^*; 陶娟; 佟萌; 聂琛

来源：肿瘤学杂志, 2019, 25(06): 503-509.

• 甲状腺肿瘤
• 微小RNA-150
• PI3K/Akt信号通路
• 增殖
• 凋亡

[目的]探讨微小RNA-150-5p(miR-150-5p)在甲状腺癌组织中的表达水平及其通过PI3K/Akt信号通路对甲状腺癌细胞增殖和凋亡能力的影响。[方法] qRT-PCR检测68例甲状腺癌患者病变组织及其相应癌旁组织中miR-150-5p的表达水平。将miR-150-5p抑制剂和阴性对照转染至人甲状腺癌TPC-1细胞株,以空脂质体作为对照,qRT-PCR检测转染结果,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡,生物信息学网站Targetscan预测mi RNA-150-5p与PI3K的靶向结合情况,荧光素酶试验验证miR-150-5p与PI3K的靶向关系,Western blotting检测Cleaved caspase-3、PI3K、Akt、p-Akt蛋白的表达。[结果] 68例甲状腺癌患者病变组织及相应癌旁组织中miR-150-5p的相对表达水平分别为0.96±0.06和1.66±0.11,差异有统计学意义(P<0.05);空白对照组和阴性对照组中miR-150-5p的表达水平差异无统计学意义(P>0.05),miR-150-5p抑制剂组中miR-150-5p的相对表达量为0.12±0.02,明显低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05)。空白对照组和阴性对照组24、48和72h细胞增殖率的差异无统计学意义(P>0.05),而miR-150-5p抑制剂组24、48和72h细胞增殖率分别为9.56%±1.38%、24.36%±4.66%和33.63%±5.32%,同一时间点均明显低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05)。空白对照组和阴性对照组48h细胞凋亡率的差异无统计学意义(P>0.05),而mi R-150-5p抑制剂组的细胞凋亡率为16.25%±2.98%,明显高于空白对照组和阴性对照组(P<0.01)。TargerScan网站预测结果显示,miR-150-5p可与PI3K互补结合,荧光素酶报告基因分析证实miR-150-5p与PI3K存在靶向结合位点。空白对照组和阴性对照组间PI3K、p-Akt和Cleaved caspase3蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05),miR-150-5p抑制剂组PI3K、p-Akt蛋白表达低于空白对照组和阴性对照组(P<0.01),Cleaved caspase3蛋白表达高于空白对照组和阴性对照组(P<0.01),3组间Akt蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05)。[结论] miR-150-5p在甲状腺癌组织中表达异常升高,干扰miR-150-5p表达能够抑制甲状腺癌TPC-1细胞株的增殖,并通过上调Cleaved caspase-3促进细胞凋亡,其调控作用可能与PI3K/Akt信号通路有关。

• 单位
  大连大学附属中山医院