超高效液相色谱-串联质谱法测定白念珠菌群体感应分子的含量

作者：李玲; 吕磊^*

来源：海军军医大学学报, 2023, 44(06): 712-717.

DOI：10.16781/j.CN31-2187/R.20220678

• 超高效液相色谱-串联质谱法
• 白念珠菌
• 群体感应分子
• 法尼醇
• 酪醇
• 3-吲哚乙醇

目的 建立一种简便、可靠和灵敏的超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)方法，用于检测白念珠菌分泌的3种群体感应分子(法尼醇、酪醇、3-吲哚乙醇)的含量。方法 样品经乙酸乙酯萃取后，采用Agilent 6470型三重四极杆串联质谱仪，通过正离子监测模式，以卡马西平为内标，在Agilent Poroshell 120 EC-C18色谱柱(3.0 mm×100 mm,2.7μm)上进行色谱分离。采用梯度洗脱，流动相为0.1%甲酸水溶液(A)和乙腈(B)，洗脱梯度为0～3 min 20%～40%B、3～4 min 40%～80%B、4～8 min 80%B，流速为0.5 mL/min，进样量为5μL，柱温为25℃，分析时间为8 min，平衡时间为2 min。采用电喷雾离子源、正离子多反应监测模式进行质谱分析。结果 法尼醇、酪醇、3-吲哚乙醇的专属性和线性关系良好(r均>0.999)，精密度和准确度均良好(日内、日间精密度均<5%，准确度的绝对值均<10%)，平均回收率为90%～115%;3种条件(室温放置4 h、4℃自动进样器放置24 h及冻融3次)下的稳定性均符合方法学要求。在浮游型样品中，3种群体感应分子的含量均随培养时间的延长而增加；而在被膜型样品中，法尼醇和酪醇在被膜成熟阶段含量降低。结论 该UHPLC-MS/MS方法可用于测定白念珠菌分泌的法尼醇、酪醇、3-吲哚乙醇的含量，为真菌群体感应分子的快速、准确检测提供参考。

• 单位
  中国人民解放军第二军医大学