幽门螺旋杆菌重组抗原表位肽C-CagAL构建及其多克隆抗体特异性分析

作者：郭乐; 周宁; 龚晓娟; 王淑娥; 狄银华; 洪丹彤; 张帆; 刘宏鹏^*; 刘昆梅^*

来源：生物技术, 2018, 28(06): 537-542.

DOI：10.16519/j.cnki.1004-311x.2018.06.0093

• 幽门螺旋杆菌
• 抗原表位肽
• 表达
• CagA
• CagL
• 特异性

[目的]制备幽门螺旋杆菌重组抗原表位肽C-CagAL,并分析其多克隆抗血清的特异性。[方法]用分子克隆技术构建重组表达质粒p ETC-CagAL,将其转入大肠杆菌中表达,利用Ni-Agarose亲和层析纯化目的蛋白C-CagAL;免疫BALB/c小鼠,制备抗C-CagAL多克隆抗血清,通过ELISA方法分析抗血清的特异性。[结果]DNAstar等软件表明C-CagAL具有较好的抗原性,Linker易形成转角或β-折叠,为柔性结构;重组抗原C-CagAL经大肠杆菌表达,约56 k Da,占菌体总蛋白的19. 82%,经Ni-Agarose亲和层析纯化,获得纯度为97. 5%的重组抗原C-CagAL;抗CCagAL多克隆抗血清能够特异性识别CagA和CagL。[结论]获得了一种能够激发抗CagA和CagL特异性抗体的重组抗原表位肽C-CagAL,为进一步研究其预防幽门螺旋杆菌感染的免疫效果奠定了基础。

• 单位
  宁夏医科大学; 宁夏医科大学总医院