利用甲胎蛋白启动子活力筛选人胚胎肝脏前体细胞

作者：王萍; 刘保清; 李卫红; 董凌月; 尤红; 贾继东; 安威; 张海燕

来源：解剖学报, 2011, 42(01): 45-49.

DOI：10.3969/j.issn.0529-1356.2011.01.008

• 肝脏前体细胞
• 细胞克隆
• 甲胎蛋白
• 启动子
• 免疫荧光 Hepatic progenitor cell
• Cell clone
• α-fetoprotein
• Promoter
• Immunofluorescence

目的利用甲胎蛋白启动子活力筛选人胚肝脏前体细胞克隆。方法经聚合酶链反应(PCR)扩增及酶切后连接,将甲胎蛋白启动子片段构建于pGL3载体中并测序鉴定,将其与pRL-TK质粒共转染到HepG2、A549和HeLa细胞中,通过相对荧光素酶活力分析甲胎蛋白启动子活力的特异性。采用克隆化培养法获得人胚胎肝脏细胞克隆,检测各克隆的甲胎蛋白启动子活力,并应用间接免疫荧光染色方法检测甲胎蛋白表达情况。结果经PCR、酶切分析及DNA序列测定证实pGL3-AFP质粒克隆成功。将其与pRL-TK质粒共转染到表达甲胎蛋白的HepG2细胞和不表达甲胎蛋白的A549、HeLa细胞中,仅在表达甲胎蛋白的HepG2细胞中检...

• 单位
  首都医科大学附属北京友谊医院; 首都医科大学