摘要
目的:构建HMGB1表达载体,转染结肠癌细胞,研究其对结肠癌细胞中血管内皮生长因子D(VEGF-D)表达的影响。方法:将分离得到的淋巴细胞总RNA反转录合成cDNA,以此为模板进行PCR扩增得到HMGB1基因;随后酶切转入载体pMD18T,通过亚克隆转入载体pLxsn,得到重组质粒。重组体质粒经酶切鉴定后,并对插入的HMGB1基因片段进行测序,将已鉴定的阳性重组质粒用脂质体介导转染HCT116细胞。通过RT-PCR和Western blotting检测HMGB1和VEGF-D的表达情况。结果:成功构建含HMGB1的表达载体。RT-PCR和Western blotting检测发现转染表达HMGB...
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单位中国人民解放军成都军区总医院; 中国人民解放军陆军军医大学