BLV拯救及其在奶牛乳腺上皮细胞中生长曲线的构建

作者：李思妍; 何思锐; 王雍; 王建发; 连帅; 武瑞^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2021, (17): 17-144.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2021.01.0250

• 牛白血病病毒
• 293-T细胞
• 奶牛乳腺上皮细胞
• 病毒拯救
• 生长曲线

为了获得单一源性的逆转录病毒毒株,并探究牛白血病病毒(Bovine leukemia virus, BLV)在奶牛乳腺上皮细胞系MAC-T中的复制模式,试验通过双酶切法验证感染性克隆,通过感染293-T细胞从感染性克隆中拯救活病毒;应用Reed-Muench方法获得该株病毒在293-T细胞和MAC-T细胞中的病毒毒价;建立BLV、293-T、F81共培养体系对拯救毒株进行验证;建立BLV+MAC-T共培养体系,采用逆转录实时荧光定量PCR方法检测,绘制该株病毒在MAC-T中生长曲线。结果表明:从感染性克隆中成功拯救并鉴定得到一株活BLV;该株病毒在293-T细胞中的毒价为97.50 TCID50/mL,在MAC-T细胞中的毒价为58.75 TCID50/mL;该株病毒感染MAC-T细胞48 h后对数增长期结束。说明BLV感染MAC-T细胞48 h后在细胞中的复制过程趋于饱和。

• 单位
  黑龙江八一农垦大学; 动物科技学院