表达EBV LMP2的小鼠骨髓间充质干细胞免疫原性初讨

作者：孙立莹; 杜海军; 李红霞; 叶树清; 周玲; 曾毅; 王湛

来源：中国病毒病杂志, 2015, 5(03): 201-207.

DOI：10.16505/j.2095-0136.2015.03.007

• EB病毒潜伏膜蛋白2
• 间充质干细胞
• 细胞毒性T淋巴细胞
• 鼻咽癌

目的贴壁法分离小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),观察表达EBV LMP2蛋白的小鼠MSCs(MSCs-LMP2)体内诱导特异性CTL应答效果。方法贴壁培养法分离BALB/c小鼠MSCs,流式细胞术鉴定MSCs纯度。利用携带EBV LMP2基因的非复制重组5型腺病毒(Ad5-LMP2)感染已鉴定小鼠MSCs,制备表达EBV LMP2蛋白的MSCs-LMP2。使用MSCs-LMP2肌内注射的方式免疫BALB/c小鼠,每次免疫剂量6×105个细胞,免疫间隔为1周,连续免疫5次。末次免疫后1周分离小鼠脾淋巴细胞,Elispot方法检测EBV LMP2特异性CTL应答。结果贴壁培养法分离、纯化的小鼠骨髓MSCs纯度可达91.8%;Ad5-LMP2感染的MSCs能很好表达LMP2蛋白,形成MSCs-LMP2,MSCs-LMP2免疫同种小鼠后,在1×106个小鼠脾淋巴细胞中,诱导产生的LMP2特异性CTL能达到323个。结论贴壁培养法能够获得纯度较高的小鼠骨髓MSCs;LMP2修饰的MSCs(MSCs-LMP2)能诱导同种小鼠产生特异性CTL应答。

• 单位
  传染病预防控制国家重点实验室; 生物工程学院; 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所; 北京工业大学