抗狂犬病病毒中和抗体快速荧光灶抑制试验方法的验证

作者：何颍; 于鹏程^*; 朱武洋

来源：中国疫苗和免疫, 2022, 28(05): 559-562.

DOI：10.19914/j.CJVI.2022107

• 狂犬病病毒
• 抗狂犬病病毒中和抗体
• 快速荧光灶抑制试验
• 回收率
• 变异系数

目的 对抗狂犬病病毒中和抗体(Rabies virus neutralizing antibody, RVNA)快速荧光灶抑制试验(Rapid fluorescent focus inhibition test, RFFIT)进行验证。方法 利用已检测RVNA效价的人狂犬病疫苗免疫后血清建立血清参考品。采用参考血清和狂犬病人免疫球蛋白标准品，评价RFFIT方法的准确性、重复性、稳定性、线性和检测范围。结果 共制备5批血清参考品(A、B、C、D和E),RVNA效价分别为57.39、16.54、8.76、1.38和0.08IU/mL。采用效价适中的参考血清C进行RFFIT方法的认证。参考血清样品C加标(4.5IU/mL、2.25U/mL和1.125IU/mL)后的回收率分别为91.70%、80.15%和74.96%。同一实验人员对相同样品检测6次的RVNA中和效价的变异系数(Coefficient of variation, CV)为7.61%;2名实验人员对相同样品各检测3次的RVNA中和效价的CV为3.88%。标准品效价值与RFFIT方法检测值的线性方程为y=0.952 4x-0.119 2(R2=0.999),最低检出效价为0.04IU/mL。不同病毒-抗体中和时间、细胞-抗体-病毒孵育时间、丙酮固定时间和荧光抗体染色时间测定的参考血清C中和效价的CV均<30%。结论 本研究建立的RFFIT方法对人狂犬病疫苗免疫后血清检测具有很好的准确性、重复性、线性和稳定性，推荐在相关血清检测中应用。

• 单位
  中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所