摘要
目的 研究1-硝基芘(1-nitropyrene, 1-NP)对小鼠精母细胞株GC-2的损伤效应及芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor, Ah R)信号通路的影响。方法 建立不同剂量1-NP染毒的GC-2细胞模型,采用CCK-8法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞周期,Western blot分析各组细胞DNA双链断裂损伤标志物γ-H2AX、DNA损伤反应通路蛋白以及Ah R通路蛋白的表达。实时荧光定量PCR检测细胞色素450 (CYP)1a1和1b1 m RNA表达水平。结果 1-NP处理可导致GC-2细胞活性降低及G2/M期细胞比例升高,同时诱导γ-H2AX蛋白表达升高,DNA损伤反应及细胞周期G2/M期检测点蛋白ATM、Chk1、Cdc25c、Cdc2的磷酸化表达水平升高,Cyclin B1表达降低。1-NP染毒也提高了GC-2细胞中Ah R核蛋白及下游靶基因CYP1A1的蛋白表达,提高了Cyp1a1和Cyp1b1的转录表达水平。结论 1-NP暴露造成小鼠生精细胞的DNA损伤、细胞周期阻滞和细胞活性抑制,其效应可能与Ah R信号通路的活化及对化学物的代谢活化有关。
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单位山西医科大学; 中国人民解放军陆军军医大学; 公共卫生学院