补肾健脾方对再生障碍性贫血患者细胞自噬的影响

作者：王文儒; 丁晓庆; 杨秀鹏; 许勇钢; 王**; 唐旭东^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 29(14): 80-87.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20231190

• 再生障碍性贫血
• 补肾健脾方
• 细胞自噬
• 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路
• 临床研究

目的：探索补肾健脾方改善再生障碍性贫血（AA）患者细胞自噬水平，以及对磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（PI3K/Akt/mTOR）信号通路的影响。方法：收集2020年9月至2021年8月期间就诊于西苑医院的AA患者30例及304医院预备行外周血造血干细胞移植的健康供者6例，分为AA组和对照组。AA组予以3个月的补肾健脾方联合环孢素A(CsA)、雄激素治疗，收集AA组（治疗前后）骨髓及对照组外周血的单个核细胞，采用透射电子显微镜检测自噬小体、实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)、mTOR、Akt、PI3K mRNA水平及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、mTOR、磷酸化（p）-mTOR、Akt、p-Akt、PI3K、p-PI3K蛋白水平。结果：AA组实际完成29例，总有效率为51.72%(15/29)。(1)与对照组比较，AA患者治疗前外周血中白细胞（WBC）、血红蛋白（HGB）、血小板（PLT）、中性粒细胞绝对计数（ANC）均显著降低（P<0.01），自噬小体偏少，LC3 mRNA水平显著降低（P<0.01）,mTOR、Akt和PI3Kα mRNA水平显著升高（P<0.01）,LC3Ⅰ和LC3Ⅱ蛋白水平均显著降低（P<0.01）,Akt、p-Akt、PI3K、p-PI3K、mTOR和p-mTOR蛋白水平均显著升高（P<0.01）；(2)与本组治疗前比较，AA患者治疗后，血红蛋白（HGB）和血小板计数（PLT）水平均明显升高（P<0.05），自噬小体增多，LC3 mRNA水平显著升高（P<0.01）,mTOR、Akt和PI3Kα mRNA水平均显著降低（P<0.01）,LC3Ⅰ和LC3Ⅱ蛋白水平显著增高（P<0.01）,Akt、p-PI3K蛋白水平显著降低（P<0.01）,p-Akt、PI3K、mTOR、p-mTOR蛋白水平明显降低（P<0.05）。结论：AA患者细胞自噬水平降低，补肾健脾方能有效改善AA患者低水平细胞自噬状态，降低PI3K/Akt/mTOR信号通路的表达。

• 单位
  北京中医药大学东方医院; 中国中医科学院西苑医院