槲皮素抑制Akt/mTOR相关糖酵解影响甲状腺癌TPC-1细胞侵袭迁移的研究

作者：连莲; 杨志坚^*; 杨波; 孟洁; 蒋超然

来源：中华肿瘤防治杂志, 2023, 30(11): 639-661.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2023.11.02

• 槲皮素
• 甲状腺癌
• 糖酵解
• Akt-mTOR
• 侵袭
• 迁移

目的 探讨槲皮素(QCT)对甲状腺癌TPC-1细胞侵袭迁移的作用及机制。方法 通过MTT实验，选择对TPC-1细胞存活率影响较轻微的QCT 10、20和40μmol/L处理24 h进行后续实验，设置对照组、QCT (10、20、40μmol/L)组、盐酸多柔比星(DOX,10μmol/L)组、QCT+IGF-1(QCT 40μmol/L+IGF-1 10μg/L)组。MTT法检测细胞存活率，Transwell实验检测细胞侵袭能力，划痕实验检测细胞迁移能力，蛋白质印迹法检测VEGF、MMP-9、MMP-2、LDHA、GLUT1、PKM2、PI3K、PTEN、IGF-1R、p70s6K、mTOR及AKT等相关蛋白表达水平，闪烁计数器评估[14C]-2-脱氧-d-葡萄糖的放射性测量葡萄糖的摄取，乳酸测定试剂盒测量乳酸水平。方差分析和t检验分析结果。结果 MTT检测半数抑制浓度(IC50),12 h IC50=142.6μmol/L,24 h IC50=84.6μmol/L,48 h IC50=62.6μmol/L。与0μmol/L QCT组比较，40μmol/L QCT组降低TPC-1细胞侵袭细胞数目(243.56±21.43和87.65±21.38)和划痕闭合率[(90.12±5.28)%和(30.12±5.09)%],并下调MMP-2(0.78±0.05和0.41±0.06)、MMP-9(0.56±0.04和0.38±0.04)、VEGF(0.64±0.05和0.28±0.06)蛋白表达，降低TPC-1细胞葡萄糖摄取量[(8.16±0.39)和(4.97±0.23)μmol/L]和乳酸产量[(17.42±1.42)和(10.05±1.43)μmol/L],下调PKM2(0.75±0.06和0.21±0.07)、GLUT1(0.72±0.05和0.19±0.06)、LDHA(0.64±0.06和0.25±0.07)、IGF-1R(0.64±0.04和0.33±0.05)、PI3K(0.57±0.05和0.24±0.04)、p-AKT/AKT(0.59±0.06和0.25±0.05)、p-mTOR/mTOR(0.62±0.05和0.28±0.04)、p-p70s6k/p70s6k(0.68±0.05和0.22±0.06)表达，上调PTEN(0.19±0.04和0.42±0.05)蛋白的表达，差异有统计学意义，均P<0.05。QCT 40μmol/L组与Akt-mTOR通路诱导物IGF-1共处理的QCT+IGF-1组比较，侵袭细胞数目[(89.64±21.52)和(188.39±21.68)μmol/L]、划痕闭合率[(32.26±5.06)%和(72.58±5.12)%]、葡萄糖摄取量[(4.92±0.04)和(10.53±0.05)μmol/L]、乳酸产量[(10.46±1.45)和(16.04±1.42)μmol/L]、MMP-2(0.42±0.06和0.61±0.05)、VEGF(0.29±0.05和0.52±0.04)以及PKM2(0.22±0.04和0.59±0.06)均被逆转，差异有统计学意义，均P<0.01。结论 QCT抑制甲状腺癌TPC-1细胞侵袭迁移，其机制可能是通过Akt-mTOR途径抑制糖酵解。

• 单位
  中国人民解放军联勤保障部队第九二四医院; 桂林医学院附属医院