miR-335-5p靶向程序化细胞死亡基因5对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响

作者：张云青; 王健; 阳春华; 李聪

来源：中国组织工程研究, 2021, 25(14): 2142-2147.

• 骨关节炎
• 软骨细胞
• miR-335-5p
• PDCD5
• 增殖
• 凋亡

背景:研究发现,miR-335-5p在骨关节炎患者关节液中表达下调,其可能与骨关节炎的发生发展有关。目的:探讨miR-335-5p对骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的影响及潜在机制。方法:分离培养人原代关节软骨细胞,以10μg/L白细胞介素1β处理软骨细胞建立骨关节炎模型,并对处理后的软骨细胞进行转染和分组:对照组(常规培养基)、白细胞介素1β组、mi R-NC组、mi R-335-5p组、si-NC组、si-PDCD5组、mi R-335-5p+pc DNA3.1组、mi R-335-5p+pcDNA3.1-PDCD5组。培养至24,48和72 h采用MTT法和流式细胞术分别检测软骨细胞增殖和凋亡率;qRT-PCR检测软骨细胞miR-335-5p、程序化细胞死亡基因5(programmed cell death 5,PDCD5)、软骨蛋白聚糖抗体(ADAMTS-5)和基质金属蛋白酶13 mRNA的表达;Western blot实验检测软骨细胞中PDCD5、Cyclin D1、p21、Bax和Bcl-2蛋白的表达,双荧光素酶报告系统验证miR-335-5p与PDCD5的调控关系。研究方案的实施符合长沙市第一医院的相关伦理要求。结果与结论:①与对照相比,白细胞介素1β可抑制软骨细胞增殖并促进细胞凋亡,抑制软骨细胞中miR-335-5p的表达;过表达miR-335-5p可促进白细胞介素1β作用的软骨细胞增殖和抑制细胞凋亡;②miR-335-5p靶向负调控PDCD5的表达;③抑制PDCD5可促进白细胞介素1β作用的软骨细胞增殖并抑制细胞凋亡;过表达PDCD5可逆转上调miR-335-5p对白细胞介素1β作用的软骨细胞增殖和凋亡的作用;④结果说明,miR-335-5p通过靶向PDCD5促进细胞增殖和抑制细胞凋亡;miR-335-5p是骨关节炎潜在分子靶点。

• 单位
  长沙市第一医院