白细胞介素1受体相关激酶4基因沉默抑制人成骨样细胞相关基因的表达

作者：杨子波; 黄保丁; 向珊珊; 邬培慧; 张志奇; 廖威明

来源：中国组织工程研究, 2013, 17(46): 7988-7993.

• 组织构建
• 骨组织构建
• 假体周围骨溶解
• 无菌性松动
• 人成骨样细胞
• 白细胞介素1受体相关激酶4
• RNA干扰
• 基因沉默
• 基因转染
• 促分裂素原活化蛋白激酶
• 国家自然科学基金

背景:造成假体周围骨溶解的完整分子机制目前尚未完全清楚。假体周围骨溶解、吸收是人工关节松动的典型病理生理过程。白细胞介素1通过MAPK信号通路影响骨吸收进程。目的:实验通过观察siRNA沉默白细胞介素1受体相关激酶4(interleukin-1 receptor-associated kinase-4,IRAK-4)基因表达对人成骨样细胞株MG63的MAPK信号转导通路的影响,为防治人工关节置换后假体周围骨溶解提供实验基础。方法:以Lipofectamine 2000为载体将IRAK-4-siRNA转染入MG63细胞。实验分为3组,空白组不加入任何转染试剂;对照组以scrambled siRNA序列进行转染;沉默组以特异性IRAK-4-siRNA序列进行转染。Western blot检测靶细胞细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38MAPK基因的表达。结果与结论:与对照组相比,靶基因沉默组的IRAK-4 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。MG63细胞IRAK-4表达下调后,与空白组和对照组相比,c-Jun氨基末端激酶1/2P46、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2、磷酸化p38MAPK表达下调分别为62%,64%,68%(P<0.05)。结果证实,siRNA沉默IRAK-4基因抑制人成骨样细胞株MG63细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38MAPK基因的表达。

• 单位
  江门市中心医院; 中山大学附属第一医院; 中山大学附属第六医院