摘要
旨在明确黄连提取物(CRE)体外抑制TGEV作用效果。CRE通过药物和病毒作用后再添加、先感染病毒再加药物、先添加药物再感染病毒3种方式作用于PK-15细胞,分别标记为试验1、2、3组,作用结束后采用MTT检测细胞活率,RT-PCR检测TGEV N基因和抗病毒相关因子(IFN-α、IFN-β、IFN-γ、 IRF-3)的表达来评价CRE抑制TGEV作用效果。结果显示:1×10-4 g/L的CRE通过3种方式处理的PK-15细胞其活率分别为54.12%、40.69%、87.67%,均极显著高于病毒组(P<0.01),且试验3组极显著高于试验1组和试验2组(P<0.01);TGEV N基因转录倍数分别降为病毒组的0.438、0.603、0.264倍,极显著低于病毒组(P<0.01);IFN-α、IFN-β、 IRF-3转录量极显著高于空白组、病毒组和药物对照组(P<0.01),IFN-γ显著(P<0.05)或者极显著高于空白组和病毒组(P<0.01)。从而表明CRE通过3种方式可以有效保护宿主细胞,抑制TGEV增殖,激发抗病毒相关因子IFN-α、IFN-β、IFN-γ和 IRF-3的表达来参与抗病毒作用,且先添加药物再感染病毒的作用方式效果最优。
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单位重庆市畜牧科学院