基质金属蛋白酶-9/血管他丁/血管内皮生长因子信号轴在糖尿病足病中的研究

作者：邹利军; 李恭驰; 胡映月; 王知; 冯自波; 杨鸿; 杜烨; 陈江海; 邹新华; 李炳辉^*

来源：中华实验外科杂志, 2018, 35(11): 2135-2138.

• 基质金属蛋白酶-9
• 血管他丁
• 血管内皮生长因子
• 糖尿病足

目的探讨基质金属蛋白酶(MMP)-9/血管他丁/血管内皮生长因子(VEGF)信号轴在糖尿病足(DF)病中的作用。方法分别采用免疫荧光染色、实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及Western blot法检测正常人及DF患者足创面处组织中MMP-9、VEGF的mRNA和蛋白表达水平。以人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)为研究对象,分为正常对照组、高糖模型组(含25 mmol/L的葡萄糖)、高糖+抗MMP-9(5μg/ml)组以及高糖+抗血管他丁(5μg/ml组,分别在12、24、48 h取细胞培养上清液和细胞,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、RT-qPCR及Western blot分别检测VEGF的分泌及表达水平。结果临床样本检测结果显示,与正常人比较,MMP-9在DF患者足创面处组织中高表达(mRNA水平:P=0. 000;蛋白水平:P=0. 000);而VEGF在DF患者足创面处组织中呈现显著的低表达(mRNA水平:P=0. 003;蛋白水平:P=0. 000)。细胞实验结果显示,在12、24、48 h分别与正常组比较,高糖组细胞中VEGF分泌及mRNA和蛋白水平表达均显著降低(分泌水平:P=0. 032、0. 006、0.004; mRNA水平:P=0. 003、0. 000、0. 000;蛋白水平:P=0. 000、0.000、0. 000);与高糖组比较,两个处理组细胞VEGF分泌及mRNA和蛋白水平表达均显著升高(抗MMP-9组分泌水平P=0. 041、0. 003、0. 000; mRNA水平:P=0. 039、0. 006、0. 005;蛋白水平:P=0. 089、0. 042、0. 037;抗血管他丁组分泌水平P=0. 005、0. 001、0. 000; mRNA水平:P=0. 004、0.001、0.000;蛋白水平:P=0.031、0. 001、0.000),且呈一定的时间依赖性。结论 DF患者足创面处组织中MMP-9及VEGF表达呈负相关;拮抗MMP-9及血管他丁的表达能显著促进高糖诱导下HUVECs的VEGF分泌及表达水平。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院; 华中科技大学同济医学院附属梨园医院