一种家蚕微孢子虫感染成品卵检测方法的研究

作者：朱春群; 张宪翠; 何恩洁; 范明亮; 孟正乐; 楼霞; 邵勇奇; 鲁兴萌^*

来源：蚕业科学, 2023, 49(05): 414-422.

DOI：10.13441/j.cnki.cykx.2023.05.004

• 家蚕
• 家蚕微孢子虫
• 成品卵
• 集团
• 检测

感染家蚕微孢子虫的成品卵检测是业内关注的技术问题之一。用磨碎管分装1 000粒蚕卵并加海绵塞，进行一段式催青的实验室二日孵化率达98.25%或以上，对生产用不同蚕品种、越年或冷藏浸酸蚕种及不同单位生产蚕种的二日孵化率最低为94.40%。用含0.01%十二烷基磺酸钠和2.00%氢氧化钠的溶液浸泡和磨碎蚕卵样本(约1 000粒),固形物去除率为83.38%。5龄起蚕添食感染5×105颗/mL家蚕微孢子虫孢子悬浮液后获取的混合蚕卵，在催青孵化后第7天检出率明显上升。1 000粒蚕卵混入3 000颗家蚕微孢子虫孢子的检出率为100%。蚕卵磨碎液用PBS缓冲液(pH=7.2～7.6)稀释40倍或以上时，qPCR法检测可稳定检出家蚕微孢子虫，检测灵敏度为4×106颗/mL,低于光学显微镜法的1.5×103颗/mL。105个一代杂交蚕种母蛾检疫批(166 623张毛种)母蛾检测和蚕卵集团检测的检出情况类似。不论是母蛾检测还是成品卵检测都涉及家蚕微孢子虫的胚传率和流行病学风险管控的阈值确定，上述研究提供了一种成品卵集团检测的方法，但实际应用尚需更为丰富的流行病学调查数据。

• 单位
  浙江大学; 湖州师范学院; 生命科学学院