伪狂犬病病毒gB蛋白单抗的制备及其夹心ELISA检测方法的建立

作者：王方; 张泽财; 袁悦; 张胜; 王旭; 林倩; 李子义^*; 王新平^*

来源：中国兽医学报, 2020, 40(02): 225-230.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.02.01

• 伪狂犬病病毒
• gB蛋白
• 单克隆抗体
• 夹心ELISA

应用PCR技术扩增出伪狂犬病病毒(PRV)gB基因,并将克隆的目的片段连接到表达载体pGEX-4T-1,构建原核表达重组质粒pGEX-4T-1-B。以表达纯化的gB重组蛋白为抗原,制备单克隆抗体和兔源多克隆抗体,并以制备的抗体建立检测PRV抗原的双抗体夹心ELISA方法,同时对吉林省某地区猪群感染PRV的情况进行流行病学调查。结果显示,试验成功制备PRV gB蛋白单抗并建立其夹心ELISA检测方法。流行病学调查发现,PRV在吉林省某地区猪群的平均感染率为9.3%,且妊娠母猪阳性率高达11.7%,该结果为伪狂犬病的防治提供了理论依据。结果表明,本研究建立的双抗体夹心ELISA方法具有特异、敏感、简便与快速等优点,可用于PRV抗原的快速检测,为今后该病的诊断和流行病学调查研究提供技术手段。

• 单位
  吉林大学第一医院; 转化医学研究院; 吉林大学