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摘要
目的 探索LL-37对膀胱尿路上皮细胞跨膜屏障功能破坏的具体作用，构建适于体外研究间质性膀胱炎（interstitial cystitis,IC）的细胞实验模型。方法 分别用不同浓度的LL-37处理人尿路上皮永生化细胞SVHUC-1，通过跨上皮电阻测量仪测量跨上皮细胞电阻，CCK-8检测细胞增殖活力，流式细胞仪检测细胞周期和钙离子浓度，RT-qPCR和WB检测葡萄糖胺聚糖（GAGs）关键成分硫酸乙酰肝素的表达水平。结果 体外细胞跨上皮电阻测量显示，100和200μg/mL LL-37可显著抑制细胞的跨上皮电阻，破坏SV-HUC-1细胞的跨膜屏障功能。CCK-8和PI染色流式细胞检测显示，100μg/mL以上的LL-37可显著降低SV-HUC-1细胞的增殖活力，提高SV-HUC-1细胞处于G0/G1期的比例（P <0.05），提示细胞增值受到显著抑制。进一步流式细胞术检测SVHUC-1细胞中的钙离子浓度显示，LL-37处理后的尿路上皮细胞内钙离子浓度显著升高（P <0.05），且增高量与LL-37浓度相关。RT-qPCR和WB检测证实经LL-37处理后SV-HUC-1细胞的GAGs关键成分硫酸乙酰肝素表达显著上调（P <0.05）。结论 抗菌肽LL-37可抑制SV-HUC-1细胞内GAGs关键成分硫酸乙酰肝素的表达，并破坏SV-HUC-1的细胞增殖和跨膜屏障功能。
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