氮芥通过激活腺苷酸活化蛋白激酶/自噬通路抑制角质形成细胞增殖活力

作者：董训虎; 陈明亮; 叶枫; 但国蓉; 邹仲敏^*

来源：第三军医大学学报, 2019, 41(14): 1295-1300.

DOI：10.16016/j.1000-5404.201901061

• 氮芥
• 自噬
• 腺苷酸活化蛋白激酶
• 角质形成细胞
• 细胞增殖

目的探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/自噬通路在氮芥(nitrogen mustard,NM)诱导角质形成细胞增殖活力下降中的作用。方法用不同浓度(1、5、10、20μmol/L)的氮芥单独或加入5 mmol/L自噬特异性抑制剂(3-methyladenine, 3-MA)、20 nmol/L自噬特异性激动剂(rapamycin, RAPA)、10μmol/L AMPK特异性抑制剂(compound C, CC)处理人角质形成细胞株(HaCaT细胞)24 h后,CCK-8法检测细胞增殖活力,Western blot检测AMPK、pAMPK、LC3-B2/B1和p62的表达水平,共聚焦显微镜观察自噬体形成。结果 NM处理后HaCaT细胞增殖活力被显著抑制(P<0.05),且处理浓度越高抑制效应越明显;当NM浓度为20μmol/L时,角质形成细胞增殖活力约下降40%。同时,NM处理能力显著提高pAMPK、LC3-B2的表达水平并下调p62的表达,且随处理浓度的增加,表达变化越明显;同时,NM可明显促进HaCaT细胞自噬体的形成。加入3-MA或CC干预后能显著抑制NM的上述效应(P<0.05),而RAPA干预对NM处理的效应无明显影响(P>0.05)。结论氮芥能够激活AMPK/自噬通路诱导角质形成细胞的毒性损伤,抑制细胞的增殖活性。

• 单位
  第三军医大学; 中国人民解放军陆军军医大学