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摘要
背景 非酒精性脂肪性肝病发病率逐年升高但无特效药物，临床和基础研究显示降糖药物胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体激动剂能改善肝脏脂质沉积，但具体机制不明确。目的 探讨GLP-1受体激动剂改善高果糖诱导的胰岛素抵抗大鼠肝脏脂质沉积的机制。方法 2016年1—4月选取Wistar大鼠36只随机分为对照（ND）组和造模组，ND组给予普通饲料、造模组给予高果糖饲料喂养，8周后行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验证实造模组胰岛素抵抗形成，继续将造模组大鼠随机分为高果糖（HFD）亚组和高果糖+艾塞那肽（HFD+Ex）亚组，HFD+Ex亚组给予艾塞那肽注射液腹部皮下注射4周后，观察糖脂水平、胰岛素抵抗、肝脏脂质沉积、β-catenin表达和核转位以及脂质合成通路因子的变化。进一步用转染技术在HepG2细胞用小干扰RNA抑制β-catenin的表达观察细胞脂质沉积和脂质合成通路相关因子的变化，将HepG2细胞用25 mmol/L果糖和100 nmol/L exendin-4处理，未转染的细胞用作对照，全部细胞分为正常对照（Con）组、高果糖（HF）组、高果糖+exendin-4(HF+Ex4)组、高果糖+exendin-4+对照siRNA(HF+Ex4+Si-control)组、高果糖+exendin-4+β-catenin siRNA(HF+Ex4+Si-β-catenin)组。实验结束后收集大鼠体质量、肝指数、三酰甘油（TG）、肝脏TG、总胆固醇（TC）、游离脂肪酸（FFA）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）、葡萄糖曲线下面积（AUCglu）、葡萄糖输注速率（GIR）、肝脏油红O染色，并测定大鼠肝脏及HepG2细胞固醇调节元素结合蛋白1(SREBP-1)和下游脂质合成的关键酶脂肪酸合成酶（FAS）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）、硬脂酰CoA脱饱和酶1(SCD-1)以及β-catenin的蛋白表达水平。结果 （1）高果糖喂养8周后造模组大鼠体质量、肝指数、肝脏TG水平均高于ND组，GIR低于ND组（P<0.05）；药物干预4周后HFD亚组大鼠体质量、肝指数、TG、FFA、ALT、FBG、FINS、AUCglu高于ND组，GIR低于ND组（P<0.05）;HFD+Ex亚组大鼠体质量、肝指数、FFA、ALT、FBG、FINS、AUCglu低于HFD亚组，GIR高于HFD亚组（P<0.05）。（2）HFD亚组大鼠肝脏TG水平高于ND组（P<0.05），油红O染色肝细胞内可见大量红色脂滴聚集；HFD+Ex亚组大鼠肝脏TG水平低于HFD亚组（P<0.05），肝细胞内红色脂滴减少。（3）HFD亚组大鼠肝脏SREBP-1、FAS、SCD-1、ACC蛋白表达均高于ND组（P<0.05）;HFD+Ex亚组大鼠肝脏SREBP-1、FAS、SCD-1、ACC蛋白表达均低于HFD亚组（P<0.05）。（4）HFD亚组大鼠肝脏β-catenin的总蛋白及核内蛋白表达低于ND组（P<0.05）;HFD+Ex亚组大鼠肝脏β-catenin的总蛋白及核内蛋白表达高于HFD亚组（P<0.05）。（5）HF+Ex4组、HF+Ex4+Si-control组HepG2细胞β-catenin总蛋白、核内蛋白表达均高于HF组，TG水平低于HF组（P<0.05）;HF+Ex4+Si-β-catenin组HepG2细胞β-catenin总蛋白、核内蛋白表达低于HF+Ex4组，TG水平高于HF+Ex4组（P<0.05）。（6）HF+Ex4组、HF+Ex4+Si-control组HepG2细胞SREBP-1、ACC、FAS、SCD-1蛋白表达均低于HF组（P<0.05）;HF+Ex4+Si-β-catenin组HepG2细胞SREBP-1、ACC、FAS、SCD-1蛋白表达高于HF+Ex4组（P<0.05）。结论 GLP-1受体激动剂可能通过调控β-catenin表达改善胰岛素抵抗大鼠肝脏脂质沉积，是治疗非酒精性脂肪性肝病的潜在新药，β-catenin可能是药物治疗的重要靶标。
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单位河北北方学院; 河北省人民医院
