全人源抗MAGE-A1单链抗体的筛选及免疫活性鉴定

作者：丁贵鹏; 朱进; 朱毅; 孙景军; 张建平; 冯振卿; 管晓虹

来源：南京医科大学学报(自然科学版), 2005, 25(07): 484-488+521.

DOI：10.3969/j.issn.1007-4368.2005.07.015

• MAGE-A1
• 肿瘤
• 单链抗体
• 全人源抗体
• 亲和常数

目的:从全人源单链噬菌体抗体库中筛选出抗MAGE鄄A1特异性单链抗体并进行免疫活性鉴定。方法:以纯化MAGE鄄A1为抗原,经过五轮吸附—洗脱—扩增,从单链噬菌体抗体库中筛选出特异性抗MAGE鄄A1噬菌体抗体,ELISA、DotBlotting检测其抗原结合能力,并对特异性较强的克隆提取质粒,表达可溶性抗体。WesternBlotting、DotBlotting、免疫细胞化学检测其抗原结合活性,非竞争ELISA法检测其亲和常数。结果:从单链噬菌体抗体库中筛选出噬菌体抗体并进行富集,经鉴定为抗MAGE鄄A1的特异性噬菌体抗体。抗MAGE鄄A1可溶性抗体分子量约为30kD,与MAGE鄄A1特异性结合,其亲和常数约为1.432×106L/mol。结论:所得全人源抗MAGE鄄A1单链抗体保留完整抗体分子结合抗原的特异性,免疫原性弱,是肿瘤导向治疗的理想载体。

• 单位
  南京医科大学; 南京医科大学第二附属医院