摘要
目的观察肝脏自然杀伤(NK)细胞对梗阻性黄疸小鼠模型肝纤维化的影响。方法将小鼠随机分为A组:手术+聚肌胞苷酸(Poly I:C)组;B组:手术组+磷酸盐缓冲液(]PBS)组;C组:假手术+Poly I:C组;D组:假手术+PBS组,每组20只。手术组行胆总管双重结扎术构建梗阻性黄疸模型,假手术组仅游离胆总管。A组、C组每48 h腹腔注射1次Poly I:C,B组、D组注射等量PBS,于第14天处死小鼠,比较各组小鼠血清肝功能指标变化,对肝脏组织行苏木素-伊红(HE)染色、Masson三染色、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫染色,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测肝脏组织NK细胞表面特异性标志NK1.1、o-SMA及肿瘤坏死因子(TNF)-αmRNA相对表达量。结果手术组血清肝功能指标高于假手术组,血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平A组[(829.78±79.33)、(752.00±67.90)U/L]较B组[(508.69±102.46)、(486.20±126.80)U/L]升高(P=0.032,P=0.030);肝脏组织HE染色、Masson三染色结果表明,A组肝纤维化程度较B组重,α-SMA免疫染色结果根据阳性细胞数及阳性强度评分A组(+++)、B组(++)、C组(+)、D组(+);NK1.1、α-SMA、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA相对表达量手术组(A组:181.79±13.68、239.67±12.09、12.39±0.87;B组:168.69±12.90、179.96±20.95、7.44±0.66)高于假手术组(C组:91.86±5.95、1.21±0.31、1.51±0.03),NK1.1 mRNA表达量均较D组升高(P=0.029,P=0.031,P=0.027)。结论 Poly I:C诱导肝脏NK细胞活化并肝内聚集,加重了梗阻性黄疸小鼠模型肝纤维化,梗阻性黄疸减弱了肝脏NK细胞的抗肝纤维化的作用。
-
单位河南省人民医院; 郑州大学