脱敏煎通过TGF-β1介导的p38MAPK信号途径对大鼠睾丸支持细胞紧密连接的调节作用

作者：翁碧霞; 娄江涛; 周俊; 魏任雄^*

来源：浙江中医药大学学报, 2019, 43(07): 634-639.

DOI：10.16466/j.issn1005-5509.2019.07.002

• 脱敏煎
• TGF-β1
• 睾丸支持细胞
• 紧密连接
• Occludin
• p38丝裂原活化蛋白激酶

[目的]探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)介导的p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号途径在睾丸支持细胞紧密连接中的作用以及脱敏煎含药血清对该信号途径的影响。[方法]体外分离培养大鼠睾丸支持细胞,分为空白对照组、阴性对照组、p38MAPK抑制剂组、TGF-β1刺激组、TGF-β1+p38MAPK抑制剂组和TGF-β1+脱敏煎组共6组。建立支持细胞原代双室培养模型,应用跨膜上皮电阻测定法检测细胞两侧跨膜上皮电阻值(trans-epithelial electrical resistance,TER);分别采用Real-time PCR和Western blot检测支持细胞闭合蛋白(Occludin)、p38MAPK的m RNA和蛋白表达量。[结果]与空白对照组比较,阴性对照组TER、Occludin和p38MAPK m RNA和蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05);与空白对照组及阴性对照组比较,p38MAPK抑制剂组TER、Occludin和p38MAPK m RNA和蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05);而TGF-β1刺激组TER和Occludin m RNA和蛋白表达均显著降低(P<0.01),p38MAPK m RNA和蛋白表达明显升高(P<0.01)。与TGF-β1刺激组比较,TGF-β1+p38MAPK抑制剂组与TGF-β1+脱敏煎组细胞TER明显升高(P<0.01),Occludin m RNA和蛋白相对表达量明显升高(P<0.01),p38MAPK m RNA和蛋白相对表达量明显降低(P<0.05或0.01)。[结论]TGF-β1可通过p38MAPK信号途径抑制Occludin蛋白表达,进而影响血睾屏障(blood-testis barrier,BTB)开闭,脱敏煎能够有效抑制p38MAPK表达,促进Occludin蛋白的表达。

• 单位
  浙江中医药大学