牙龈卟啉单胞菌脂多糖对树突状细胞成熟及功能影响的体外研究

作者：苏寒; 毛钊; 陈伟; 郭婷; 闫翔

来源：东南国防医药, 2017, 19(05): 465-472.

• 树突状细胞
• 牙龈卟啉单胞菌脂多糖
• 大肠杆菌脂多糖
• 细胞表型
• 抗原提呈

目的研究牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.gingivalis-LPS)的刺激对大鼠树突状细胞(DCs)成熟及功能的影响,为探索DCs在牙周炎的发生发展中的作用机制提供实验依据。方法采用流式细胞学方法检测P.gingivalis-LPS和大肠杆菌脂多糖(E.coli-LPS)刺激下,CD11c+MHCⅡ+、CD11c+CD80+、CD11c+CD86+和CD11c+CD40+DCs的比率;采用ELISA法检测DCs分泌白介素-12(IL-12)、干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-10(IL-10)和白介素-13(IL-13)的量。采用CCK8法检测与上述DCs共培养的CD4+T细胞的增殖;采用ELISA法检测T细胞分泌IL-2、IFN-γ、IL-10和IL-13的量。在上述的培养系统中加入Toll样受体4(TLR4)抑制剂(polymyxin B,PmB)或TLR2/TLR4抑制剂(oxidation of 1-palmitoyl-2-arachidonyl-sn-glycero-3-phosphorylcholine,OxPAPC),观察TLR抑制剂对上述DCs成熟及功能的影响。结果 P.gingivalis-LPS与E.coli-LPS均能刺激DCs成熟。TLR4抑制剂明显抑制E.coli-LPS组DCs成熟和抗原提呈功能,对P.gingivalis-LPS组DCs成熟和抗原提呈功能没有显著抑制。TLR2/TLR4抑制剂对P.gingivalis-LPS组DCs成熟和抗原提呈功能显著抑制。P.gingivalis-LPS组DCs分泌IL-12和IFN-γ的量低于E.coli-LPS组(P<0.05);P.gingivalis-LPS组DCs分泌IL-10和IL-13的量高于E.coli-LPS组(P<0.05)。与P.gingivalis-LPS和E.coli-LPS共培养的DCs均能促进CD4+T细胞增殖。与P.gingivalis-LPS组DCs共培养的T细胞分泌IL-2和IFN-γ的量低于E.coli-LPS组(P<0.05);其分泌IL-10的量高于E.coli-LPS组(P<0.05)。结论 P.gingivalis-LPS能促进DCs的成熟和抗原提呈功能。P.gingivalis-LPS刺激下的DCs促进Th2型免疫应答;E.coli-LPS刺激下的DCs促进Th1型免疫应答。P.gingivalis-LPS通过TLR2通路刺激DCs成熟;E.coli-LPS通过TLR4通路刺激DCs成熟。

• 单位
  南京大学; 南京军区南京总医院