三角帆蚌ISSR-PCR优化反应体系的建立

作者：李跃华; 陈婵娟; 许志强; 葛家春

来源：江苏农业科学, 2009, (02): 61-64.

• 三角帆蚌
• ISSR
• 体系优化

采用ISSR技术对三角帆蚌基因组DNA进行PCR扩增,筛选、分析了ISSR-PCR扩增时的主要影响因子,包括Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、酶浓度、甲酰胺浓度等,建立了三角帆蚌的ISSR-PCR优化反应体系,为进一步研究三角帆蚌种质资源状况奠定基础。最终确立的适用于三角帆蚌ISSR扩增的25μl反应体系为:MgCl21.5mmol/L,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.2μmol/L,Taq酶1.0 U,甲酰胺1%,DNA模板量约50 ng。

• 单位
  生命科学学院; 南京大学; 江苏省淡水水产研究所