杜氏盐藻糖原合成酶激酶3cDNA片段的克隆及其在鞭毛再生中的功能

作者：毛丽红; 李庆华; 韩康; 王瑞莉; 龚方华; 薛乐勋

来源：郑州大学学报(医学版), 2013, (02): 167-170.

• 杜氏盐藻
• 糖原合成酶激酶3
• 鞭毛再生 Dunaliella salina
• glycogen synthase kinase 3
• flagellar regeneration

目的:克隆杜氏盐藻糖原合成酶激酶3(GSK3)基因序列并探讨它在鞭毛再生中的作用。方法:根据杜氏盐藻转录组测序得到的GSK3的2个片段设计上下游引物,提取盐藻总RNA进行RT-PCR,以此为模板扩增2个片段之间的序列。采用3'RACE方法扩增杜氏盐藻GSK3基因3'端序列,通过杜氏盐藻消减杂交模板扩增得到5'端序列。采用pH休克法去除杜氏盐藻鞭毛,通过实时荧光定量PCR观察鞭毛再生过程中GSK3基因在转录水平上的变化。结果:获得一段长为2116bp的GSK3 cDNA片段,其中包含737bp的3'UTR和1158bp的开放阅读框。实时荧光定量PCR结果表明,GSK3的mRNA转录水平在鞭毛再生...

• 单位
  郑州大学第一附属医院