丙型肝炎病毒核心蛋白抑制shRNA介导的RNA干扰作用

作者：易敏; 黄文娟; 宋彩虹; 陆水英; 李升锦; 陈维贤

来源：第三军医大学学报, 2012, (12): 1162-1166.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2012.12.001

• 丙型肝炎病毒
• 核心蛋白
• RNA干扰
• 抑制因子 hepatitis C virus
• core protein
• RNA interference
• suppressor

目的研究丙型肝炎病毒编码的蛋白对RNA干扰的抑制作用,筛选出有作用的RNA干扰抑制因子。方法构建丙型肝炎病毒不同蛋白质的真核表达质粒,加入萤火虫荧光素酶基因的RNA干扰体系,共转染HeLa细胞,检测萤火虫荧光素酶活性以观察RNA干扰效果的变化,筛选出有作用的RNA干扰抑制因子。在针对内源性GFP的RNA干扰体系中进一步确证该种抑制作用。利用共转染方法观察该蛋白抑制RNA干扰的剂量效应关系、在不同细胞系中的作用以及对siRNA介导的RNA干扰是否有相同的拮抗作用。结果加入核心蛋白后,萤火虫荧光素酶活性恢复到80%,与空白对照比较有显著性差异(P<0.05)。在绿色荧光蛋白RNA干扰体系中,核心蛋...

• 单位
  重庆医科大学附属第二医院