神经生长因子在诱导树突状细胞分化中的作用

作者：夏清; 谭洪毅; 潘频华; 苏晓丽; 胡成平

来源：中南大学学报(医学版), 2015, 40(08): 829-836.

• 神经生长因子
• 树突状细胞
• 分化

目的:在体外探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)在刺激小鼠骨髓来源的树突状细胞(dendritic cells,DCs)分化过程中的作用。方法:首先取C57BL/6小鼠股骨、胫骨骨髓细胞,按培养过程中干预因素不同分为磷酸盐缓冲液(phosphate buff ered saline,PBS)刺激组(PBS组,n=6)、NGF刺激组(NGF组,n=6)、粒巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte monocyte colony stimulating factor,GM-CSF)和IL-4共刺激组(GM-CSF+IL-4组,n=6)、NGF加GM-CSF和IL-4共刺激组(NGF+GM-CSF+IL-4组,n=6),培养第7天采用流式细胞仪比较各组间CD11c+细胞阳性率和CD8a-亚型比例;然后用GM-CSF+IL-4刺激培养未成熟的DCs,经CD11c免疫磁珠阳性分选得到纯化的未成熟DCs,将其分为PBS组(n=6)、NGF组(n=6)、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组(LPS组,n=6)、NGF+LPS组(n=6),分别用PBS,NGF,LPS,NGF+LPS诱导细胞成熟,24 h后酶联免疫吸附分析法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测上清液中IL-6,IL-10和IL-12的水平。结果:1)NGF组CD11c+DCs百分比高于PBS组,低于GM-CSF+IL-4组(均P<0.05);GM-CSF+IL-4组与NGF+GM-CS F+IL-4组间比较,差异无统计学意义(P>0.05),且在4组中均以CD8a-DCs为主;2)NGF可以增强LPS诱导的DCs分泌IL-6,IL-10和IL-12(均P<0.05),而单独NGF刺激对DCs分泌IL-6,IL-10和IL-12无影响(均P>0.05)。结论:NGF可以诱导小鼠骨髓细胞向CD11c+DCs的定向分化,并且以CD8a-亚型为主;NGF能增强LPS诱导的DC分泌IL-6,IL-10和IL-12。

• 单位
  中南大学湘雅医院