摘要
目的 探讨环状RNADENN/MADD域内含蛋白4C(circDENND4C)在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移、侵袭的影响和机制。方法 收集41例宫颈癌患者的癌组织及其癌旁组织,实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测组织中circDENND4C和miR-4465表达。体外培养HeLa细胞,双荧光素酶报告基因实验验证circDENND4C和miR-4465的调控关系。HeLa细胞分为正常对照(NC)组、小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、circDENND4C小干扰RNA(si-circDENND4C)组、模拟对照(miR-NC)组、miR-4465组、si-circDENND4C+抑制剂阴性序列(anti-miR-NC)组和si-circDENND4C+miR-4465抑制剂(anti-miR-4465)组,通过四噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Westernblot检测细胞中Ki-67、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达。结果 宫颈癌组织中circDENND4C的表达显著高于癌旁组织(P<0.05),而miR-4465的表达显著低于癌旁组织(P<0.05)。circDENND4C在HeLa细胞中靶向负调控miR-4465表达。si-circDENND4C组HeLa细胞光密度(OD)值、迁移数、侵袭数及细胞中Ki-67、MMP-2和MMP-9蛋白表达量显著低于si-NC组(P<0.05)。miR-4465组HeLa细胞OD值、迁移数、侵袭数及Ki-67、MMP-2和MMP-9蛋白表达量显著低于miR-NC组(P<0.05)。si-circDENND4C+anti-miR-4465组HeLa细胞OD值、迁移数、侵袭数及Ki-67、MMP-2和MMP-9蛋白表达量显著高于si-circDENND4C+anti-miR-NC组(P<0.05)。结论 circDENND4C在宫颈癌组织中表达升高,其可通过负调控miR-4465促进宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭。
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