DDIT3调控TNF-α刺激下ATDC5细胞软骨向分化

作者：杨畅; 许筱霄; 董晓菲; 董伟; 王家伟^*

来源：口腔医学研究, 2021, 37(05): 448-452.

DOI：10.13701/j.cnki.kqyxyj.2021.05.014

• DNA损伤诱导转录因子3
• 肿瘤坏死因子-α
• ATDC5细胞
• 软骨向分化

目的:探究在肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激下,DNA损伤诱导转录因子3(DNA damage inducible transcript 3,DDIT3)对ATDC5细胞软骨向分化的调控。方法:不同浓度TNF-α(0、1、10、20 ng/mL)刺激下诱导ATDC5细胞分化7 d,同时在10 ng/mL TNF-α刺激下诱导慢病毒稳定转染ATDC5细胞分化7 d, qRT-PCR检测炎症相关因子环氧化酶(cyclooxygenase, COX)2、白细胞介素(interleukin, IL)-6、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)2、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)-13的表达,Western blot检测DDIT3、软骨向分化指标Sox9、Col10a1以及p-AKT、AKT蛋白表达情况,阿尔新蓝染色检测细胞外基质形成情况。结果:不同浓度TNF-α刺激下诱导ATDC5细胞分化引起COX2、IL-6、NOS2、MMP-13和DDIT3表达明显升高,Sox9、X型胶原蛋白(collagen type X alpha 1 chain, Col10a1)的表达下降。敲低DDIT3部分逆转了10 ng/mL TNF-α刺激导致的Sox9、Col10a1的表达下降和细胞外基质形成减少,同时促进磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,AKT)蛋白表达。结论:在TNF-α诱导的炎症微环境中,DDIT3调控了ATDC5细胞软骨向分化。

• 单位
  武汉大学