川芎嗪对小鼠脑缺血再灌注损伤的影响

作者：喻志慧; 黎良达^*

来源：中国临床药理学杂志, 2020, 36(12): 1648-1652.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2020.12.013

• 川芎嗪
• 脑缺血再灌注损伤
• Ras相关的C3肉毒素底物1
• 氧化应激

目的研究川芎嗪缓解小鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)的作用及其机制。方法 (1)按照体重将BALB/C小鼠随机分为5组:假手术组,模型组和低、中、高3个剂量实验组。用改良尼龙线栓塞法制备小鼠CIRI模型。造模后,低、中、高3个剂量实验组分别给予川芎嗪1, 2,4 mg·kg-1,均连续干预15 d。计算小鼠的脑梗死面积百分比,用试剂盒法检测丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。(2)将HT22细胞分为11组:空白对照组(不做处理),H2O2组、低、中、高3个剂量实验组(5,10,20 mg·L-1川芎嗪分别处理24 h)和第1干预组至第6干预组。第1干预组至第3干预组分别转染Lipofectamine 2000(NC)、mimics和inhibitor,第4干预组至第6干预组分别加入过表达Ras相关的C3肉毒素底物1(RAC1)、敲低RAC1、慢病毒处理和敲低RAC1后转染inhibitor。除空白对照组外,其他细胞经120μmol·L-1 H2O2处理0.5 h。以流式细胞仪检测细胞凋亡率和活性氧(ROS)相对表达水平;用蛋白质印迹法检测RAC1蛋白表达水平。结果 (1)假手术组、模型组和低、高2个剂量实验组的小鼠脑梗死面积百分率分别为(0.41±0.15)%,(35.22±2.49)%,(26.58±2.13)%和(14.26±1.57%);这4组的MDA分别为(0.83±0.11),(1.95±0.36),(1.51±0.32)和(1.13±0.22)nmol·mg-1;这4组的SOD分别为(92.13±13.58),(41.37±5.64),(61.05±8.97)和(79.48±9.80)NU·mg-1,模型组与假手组相比或者低、高2个剂量实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。(2)空白对照组、H2O2组和低、高2个剂量实验组的ROS相对表达水平分别为(0.10±0.02)×10-2,1.00±0.14,0.71±0.08和0.38±0.05;H2O2组与空白对照组相比或者低、高剂量2个实验组与H2O2组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。第1干预组至第3干预组的RAC1蛋白表达水平分别为1.00±0.11,0.34±0.04和2.07±0.15,第2,3干预组与第1干预组比较或第3干预组与第2干预组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);空白对照组、H2O2组和第4干预组至第6干预组的ROS水平分别为0.01±0.00,1.00±0.14,0.39±0.05,1.58±0.18和0.67±0.07,第4,5,6干预组与H2O2组比较或第6干预组与第5干预组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论川芎嗪缓解小鼠CIRI,这可能与抑制RAC1有关。

• 单位
  宁波大学; 神经内科