多杀性巴氏杆菌转铁结合蛋白TbpA的原核表达及免疫原性

作者：王斐; 张洪峰; 梁婉; 彭忠^*; 陈焕春; 吴斌^*

来源：中国兽医学报, 2019, 39(06): 1151-1156.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.06.19

• 牛源A型多杀性巴氏杆菌
• 转铁结合蛋白
• 克隆表达
• 小鼠

为研究多杀性巴氏杆菌转铁结合蛋白TbpA的免疫原性,本试验利用PCR从牛源A型多杀性巴氏杆菌HB01基因组中扩增了TbpA的编码基因tbpA,并将其克隆至原核表达载体pET-30α(+)上,转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达。SDS-PAGE检测结果显示,rTbpA蛋白成功表达。Western blot证实该蛋白能够与抗多杀性巴氏杆菌HB01血清发生阳性反应。将rTbpA免疫小鼠后,分别于免疫后14,28 d采血,利用ELISA试验检测血清中的抗体滴度,结果显示血清中的抗rTbpA蛋白的IgG抗体显著升高(P<0.05)。感染试验结果显示,免疫rTbpA蛋白能够保护70%的小鼠抵抗多杀性巴氏杆菌的致死性攻击,并且病理切片结果表明,免疫小鼠的肺部损伤相对于对照组小鼠显著降低。本试验为筛选新型的多杀性巴氏杆菌免疫原性蛋白提供依据。

• 单位
  农业部; 华中农业大学; 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所; 农业微生物学国家重点实验室