大鼠EPO真核表达载体的构建及其在骨髓间充质干细胞中的表达

作者：王文益; 赵聪敏; 廖伟

来源：第三军医大学学报, 2009, 31(22): 2186-2188.

• 促红细胞生成素
• 真核表达载体
• 骨髓间充质干细胞
• 缺氧缺血性脑病 erythropoietin
• eukaryotic expression vector
• bone marrow mesenchymal stem cells
• hypoxic-ischemic brain damage

目的构建表达大鼠促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)的真核表达质粒pEGFP-N1/EPO,并检测其在体外的表达。方法从大鼠肾脏获得EPO基因片段并用RT-PCR方法扩增,将其连接于真核表达质粒pEGFP-N1,测序鉴定后,用脂质体包裹转染大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),采用免疫组化和RT-PCR检测EPO的表达。结果经酶切和测序鉴定证实本实验构建的重组表达质粒正确,该质粒在体外转染大鼠MSCs细胞后可表达EPO蛋白。结论成功构建的pEGFP-N1/EPO重组质粒能在体外表达EPO蛋白。

• 单位
  第三军医大学新桥医院