摘要
探讨3种脲类细胞分裂素(UCTK):N-苯基-N-噻唑基脲(PBU)、苯基噻二唑脲(TDZ)和氯吡苯脲(CPPU))诱导尾叶桉(Eucalyptus urophylla)愈伤组织分化的效果及作用机理。将下胚轴接种在含0.57μmol/L 6-BA+0.57μmol/L IAA的SPCa培养基,再添加4μmol/L的单种UCTK或浓度各为2μmol/L的UCTK间的两两组合。8周后,UCTK组合诱导所得再生型愈伤组织比例均高于49.27%,显著高于单种UCTK的不到29%。与单种UCTK处理相比,UCTK组合诱导的愈伤组织H2O2质量摩尔浓度降低、超氧阴离子清除速率下降、SOD活性则无规律性变化。与PBU处理相比,UCTK组合使6周龄愈伤组织的6个SOD基因的转录全部上调。设PBU+CPPU组合诱导所得2周龄愈伤组织中对应基因表达值为1,分析UCTK组合诱导愈伤组织膨大和分化过程中SOD基因的表达变化,发现SOD1和SOD3基因的转录变化最为显著。CPPU+TDZ处理2周后,SOD1和SOD3的转录达最大值,分别为762.53和1 119.82;PBU+TDZ处理6周后,SOD1和SOD3的转录达最大值,分别为1 501.81和7 086.52;PBU+CPPU处理10周后,SOD1和SOD3的转录达最大值,分别为524.77和14 789.44。分析结果可知:不同UCTK有协同效应,通过影响ROS代谢,减轻桉树愈伤组织褐化,促进分化;UCTK组合处理后,SOD1和SOD3的转录水平变化极为显著,预示其与愈伤组织分化密切相关。
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