乳铁蛋白对MPP+诱导的帕金森病细胞模型炎症损伤的保护作用及机制研究

作者：汪晓语; 单树方; 吕嘉琦; 赵儒花; 周嗣全; 成果^*; 张伶俐; **

来源：中国现代医学杂志, 2023, 33(09): 41-50.

• 帕金森病
• 乳铁蛋白
• 1-甲基-4-苯基吡啶
• 炎症损伤

目的 探讨外源性乳铁蛋白对1-甲基-4-苯基吡啶(MPP+)诱导的小鼠神经母细胞瘤N2a细胞帕金森病(PD)模型炎症损伤的保护作用及其机制。方法 以250μmol/L的MPP+诱导N2a细胞损伤构建PD细胞模型，将模型随机分为对照组、乳铁蛋白组、MPP+组和乳铁蛋白+MPP+组。采用CCK-8法检测细胞存活率；Annexin FITC/PI双染法检测细胞凋亡率；Hoechst33342染色检测细胞早期凋亡情况；检测各组的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)水平；采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞IL-4、IL-6、IL-13、IL-1β、TNF-α mRNA的表达；Western blotting检测不同浓度MPP+(0、100、250、500、1 000μmol/L)N2a细胞的酪氨酸羟化酶(TH)和多巴胺转运体(DAT)蛋白的表达，检测各组的Bcl-2、Bax、Caspase-3、Cleaved Caspase-3、p38、p-p38、JNK、p-JNK、ERK、p-ERK蛋白的表达。结果 MPP+组细胞凋亡率较对照组上升(P<0.05)，乳铁蛋白+MPP+组细胞凋亡率较MPP+组下降(P<0.05);MPP+组细胞核亮染阳性数目较对照组增加(P<0.05)，而乳铁蛋白+MPP+组亮染阳性数目较MPP+组减少(P<0.05)；与对照组比较，MPP+组Bax蛋白相对表达量升高(P<0.05),Bcl-2蛋白相对表达量减少(P<0.05),Cleaved Caspase-3/Caspase-3相对表达量升高(P<0.05)；与MPP+组比较，乳铁蛋白+MPP+组Bax蛋白相对表达量降低(P<0.05),Bcl-2蛋白相对表达量升高(P<0.05),Cleaved Caspase-3/Caspase-3相对表达量降低(P<0.05)。与MPP+组比较，乳铁蛋白+MPP+组TH和DAT蛋白相对表达量升高(P<0.05),GSH-Px活性升高，MDA水平下降(P<0.05)。与MPP+组比较，乳铁蛋白+MPP+组促炎因子IL-6、IL-1β、TNF-α m RNA相对表达量降低，抑炎因子IL-4、IL-13 mRNA相对表达量升高(P<0.05)。与对照组比较，MPP+组p-p38、p-JNK和p-ERK蛋白相对表达量升高，p-p38/p38、p-JNK/JNK、p-ERK/ERK比值增加(P<0.05)；与MPP+组比较，乳铁蛋白+MPP+组p-p38、p-JNK和p-ERK蛋白相对表达量降低，p-p38/p38、p-JNK/JNK、p-ERK/ERK比值降低(P<0.05)。结论 乳铁蛋白可能抑制MAPKs信号通路的活化，以及该通路活化所诱导的炎症反应，从而改善MPP+所致N2a细胞的炎症损伤。

• 单位
  四川大学华西第二医院