柠檬烯转化酶的提取条件优化及酶学性质研究

作者：张莹莹; 李志; 张璐璐; 李晓; 范刚^*; 彭芷芊; 任婧楠; 潘思轶

来源：华中农业大学学报, 2020, 39(04): 105-113.

DOI：10.13300/j.cnki.hnlkxb.2020.04.015

• 指状青霉
• 柠檬烯
• 提取条件
• 生物转化
• 柠檬烯转化酶
• 响应面优化
• 酶活性

以指状青霉(Penicillium digitatum) DSM62840为研究对象,采用高压细胞破碎法破碎菌体,对其转化柠檬烯生成α-松油醇过程中的相关酶的提取条件进行优化。以柠檬烯转化酶活性为指标,在单因素试验的基础上结合响应面试验法,确定最佳提取条件;同时,对柠檬烯转化酶的酶学性质进行了初步探索。结果显示,最佳提取条件为:破碎压力100 MPa、破碎6次、液料比15∶1 (mL/g),在此条件下,α-松油醇的质量浓度为855.75 mg/L,酶活力达到71.31 U。柠檬烯转化酶最佳转化时间为4 h,在磷酸盐缓冲液中获得的酶活性最高;该酶可能为细胞色素P450,且不同的金属离子对酶活性的影响不同:Fe2+对酶有轻微的抑制作用,而Ca2+、Mg2+、Mn2+、Zn2+、Co2+、Ba2+、Na+、K+、Fe3+、Ni2+则对酶有不同程度的激活作用。粗酶液SDS-PAGE电泳结果表明优化后的提取工艺效果较好。

• 单位
  华中农业大学