DREAM短发卡质粒载体的构建及在C6细胞中沉默DREAM基因的效应

作者：程智刚; 莫秋华; 李靖怡; 王云姣; 白念岳; 贺正华; 胡浩; 杨胜辉; 鄢建勤; 郭曲练

来源：中国现代医学杂志, 2011, (10): 1129-1134+1139.

• RNA干扰
• 下游调控元件拮抗分子
• 质粒
• 载体 RNA interference
• DREAM
• plasmid
• vector

目的构建表达下游调控元件的拮抗分子(DREAM)基因序列特异性的短发卡RNA(shRNA)质粒载体,检测其对C6细胞DREAM基因的干扰作用,为研究DREAM基因功能提供有力工具。方法为了构建pRNAT-U6.1/Neo载体介导DREAM shRNA表达的质粒,针对DREAM的19碱基大小的片段,分别设计3对寡核苷酸和1条非特异性阴性对照序列,形成双链后将其依次连入带有U6启动子的pRNAT-U6.1/Neo载体(命名为pRNAT-DREAM),两对DNA双链连接后形成中间由9个碱基序列间隔的反向互补序列,构建成能产生DREAM shRNA的质粒。用构建成功的4条质粒转染C6细胞,分别采用Re...

• 单位
  中南大学湘雅医院