马达里亚加病毒TaqMan RT-PCR检测方法的建立

作者：殷启凯; 刘文婧; 王国玮; 张维嘉; 付士红; 韩坤; 许崇晓; 许松涛; 李樊; 刘亚宁; 何英; 王振海; 聂凯^*; 王环宇^*

来源：中国人兽共患病学报, 2022, 38(05): 428-432.

• 马达里亚加病毒
• TaqMan RT-PCR
• 分子诊断

目的 建立马达里亚加病毒(Madariaga virus, MADV)早期且快速的TaqMan反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法。方法 从GenBank中下载MADV基因序列，根据多序列比对结果选择MADV的NSP1基因中的高保守序列片段设计引物与探针，利用体外转录的RNA标准品建立了MADV的绝对定量分析模型，并进行灵敏度和特异性评价以及重复性验证。结果 该检测方法的灵敏度为1.0×10~2拷贝/反应，与其它虫媒病毒无交叉反应，重复性检测变异系数均小于1.5%。通过本研究建立的快速检测方法对源自宁夏回族自治区、浙江省和云南省的共计81份不明原因脑炎病例血清标本及161批库蚊标本进行了测定，检测结果均为阴性。结论 成功建立了MADV TaqMan RT-PCR的快速检测方法，可应用于实验室的早期检测。

• 单位
  宁夏回族自治区疾病预防控制中心; 宁夏医科大学; 宁夏医科大学总医院; 传染病预防控制国家重点实验室; 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所