摘要
目的探讨Gremlin对小鼠原代肝星状细胞增殖和凋亡及细胞外基质分泌的影响。方法采用经典肝脏二步酶灌注法分离小鼠原代肝星状细胞并培养。随机将肝星状细胞分为对照组、DMSO组及Gremlin低、高剂量组。对照组与DMSO组分别加入DMEM完全培养基、含0.05%DMSO的DMEM培养基培养,Gremlin低、高剂量组分别加入含100、200μg/L Gremlin的DMEM培养基培养。培养24 h,采用CCK-8法、流式细胞术检测各组细胞增殖率、细胞凋亡率,采用RT-q PCR法、Western blotting法检测各组CollagenⅠ、CollagenⅢ、a-SMA mRNA和蛋白表达。结果 Gremlin低、高剂量组细胞增殖率均高于对照组和DMSO组,细胞凋亡率均低于对照组和DMSO组(P均<0.05);Gremlin低剂量组与Gremlin高剂量组、对照组与DMSO组细胞增殖率、细胞凋亡率比较P均>0.05。Gremlin低、高剂量组CollagenⅠ、CollagenⅢ、a-SMA mRNA相对表达量均高于对照组、DMSO组(P均<0.05),且Gremlin高剂量组高于Gremlin低剂量组(P均<0.05),而对照组与DMSO组比较P均>0.05。Gremlin高剂量组CollagenⅠ、CollagenⅢ、a-SMA蛋白相对表达量均高于Gremlin低剂量组、对照组、DMSO组(P均<0.05),Gremlin低剂量组、对照组、DMSO组组间两两比较P均>0.05。结论 Gremlin能诱导小鼠原代肝星状细胞活化,使其分泌细胞外基质增加,从而参与肝纤维化的发生、发展。
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单位遵义医学院附属医院